La DNA polimerasi β comprende un dominio aminoterminale di 8 kDa e un dominio carbossi-terminale di 31 kDa. Il dominio N-terminale che lega l'ssDNA ha un'attività di fosfodiesterasi del desossiribosio, mentre il dominio C-terminale ha un'attività di nucleotidiltransferasi. La DNA polimerasi β di mammifero, una polimerasi di riparazione del DNA, è espressa costitutivamente nelle cellule in coltura, ma il trattamento delle cellule con agenti DNA-alchilanti come la N-metil-N'- nitro-N-nitrosoguanidina (MNNG) o il metil metanesulfonato aumenta il livello di beta-pol. La DNA polimerasi β riempie le lacune di singoli nucleotidi nel DNA prodotte dalla via di riparazione per escissione di basi delle cellule di mammifero.