La ADN polimerasa β comprende un dominio aminoterminal de 8-kDa y un dominio carboxi-terminal de 31-kDa. El dominio N-terminal de unión al ssADN tiene una actividad desoxirribosa fosfodiesterasa, mientras que el dominio C-terminal tiene una actividad nucleotidiltransferasa. La ADN polimerasa β de mamíferos, una polimerasa reparadora del ADN, se expresa de forma constitutiva en células cultivadas, pero el tratamiento de las células con agentes alquilantes del ADN como la N-metil-N'- nitro-N-nitrosoguanidina (MNNG) o el metil metanosulfonato aumenta el nivel de beta-pol. La ADN polimerasa β rellena los huecos de un solo nucleótido en el ADN producidos por la vía de reparación por escisión de bases de las células de mamíferos.