L'ADN polymérase β comprend un domaine aminoterminal de 8 kDa et un domaine carboxy-terminal de 31 kDa. Le domaine N-terminal de liaison à l'ADN ss a une activité de désoxyribose phosphodiestérase, tandis que le domaine C-terminal a une activité de nucléotidyltransférase. L'ADN polymérase β de mammifère, une polymérase de réparation de l'ADN, est exprimée de manière constitutive dans les cellules en culture, mais le traitement des cellules avec des agents alkylants de l'ADN tels que la N-méthyl-N'- nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) ou le méthanesulfonate de méthyle augmente le niveau de bêta-pol. L'ADN polymérase β comble les lacunes d'un seul nucléotide dans l'ADN produites par la voie de réparation par excision de bases des cellules de mammifères.